vmest.ru страница 1
скачать файл

Сборник научных трудов ГосНИОРХ. Вып. 281. 1988. С. 138-140.
УДК 638.7
ПОДУШКА С. Б., КУРИЛИЧЕВ С. Н., НИКОЛАЕВ С. В.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ САМЦОВ ОЗЕРНОЙ ЛЯГУШКИ ДЛЯ ТЕСТИРОВАНИЯ СИНТЕТИЧЕСКИХ АНАЛОГОВ ЛЮЛИБЕРИНА
Основным гормональным препаратом, используемым для получения зрелых половых продуктов от рыб при искусственном разведении, до настоящего времени остаются ацетонированные гипофизы. Вопрос о необходимости замены гипофизов другими, более доступными и дешевыми препаратами был поставлен около четверти века тому назад (Гербильский, 1964). Однако радикальное решение этой проблемы наметилось лишь в последние годы, когда на практике была доказана возможность созревания половых продуктов у рыб различных видов после введения им синтетических гонадотропин-релизинг гормонов (люлиберина и его аналогов). В СССР наибольшие успехи в этом отношении достигнуты в осетроводстве (Гончаров, 1984).

В настоящее время во многих странах ведется интенсивная работа по синтезу суперактивных аналогов люлиберина, биологическая активность которых может в десятки раз превышать активность природного соединения. В связи с этим возникает задача тестирования новых препаратов. В практике рыбоводства принято оценивать активность ацетонированных гипофизов по их способности вызывать реакцию спермиации у самцов озерной лягушки Rana ridibunda (Боев, 1980).



Таблица 1

Результаты тестирования ЛГРГ на самцах озерной лягушки

Доза препарата, мкг на животное



Октябрь

Май

Количество животных

инъециро-ванных

давших реакцию

инъециро-ванных

давших

реакцию


5,00





2

2

2,00

2

2





1,50

3

2





1,00

3

1

3

3

0,75





3

0

0,50

3

0

3

0

0,25

3

0

3

0

0,13

3

0




Мы попытались использовать этот же тест-объект для оценки люлиберина (ЛГРГ) и двух его новых аналогов (а-ЛГРГ-1 и а-ЛГРГ-2), синтезированных на кафедре химии природных соединений Ленинградского государственного университета. Самцов озерной лягушки отлавливали в водоемах Астраханской области. В апреле-мае тестирование проводили на недавно отловленных животных. В другие месяцы (октябрь-март) использовали лягушек, заготовленных в октябре и сохранявшихся до начала опытов в холодильнике в аквариумах с водой. За двое суток до начала тестирования лягушек переводили в садки без воды, установленные в помещении с комнатной температурой (18—22°С). Испытуемые препараты растворяли в дистиллированной воде и инъецировали лягушкам под кожу в области спины. Положительный эффект фиксировали под микроскопом по появлению множества подвижных сперматозоидов в клоакальной жидкости лягушек. Проверку подопытных животных на наличие сперматозоидов проводили перед инъецированием и через час после введения препарата. В случае отрицательного результата еще через два часа производили повторный контроль. Результаты тестирования представлены в табл. 1—3. Среди испытанных препаратов наиболее активным оказался а-ЛГРГ-2, а самым слабым — ЛГРГ. Помимо озерной лягушки в качестве тест-объектов могут быть использованы и другие виды бесхвостых амфибий. Так, нами установлено, что а-ЛГРГ-1 вызывает реакцию спермиации и у самцов травяной лягушки Rana temporaria, но детальное тестирование на этом виде не проводилось.


Таблица 2

Результаты тестирования а-ЛГРГ-1 на самцах озерной лягушки


Доза препарата, мкг на животное


Ноябрь


Январь

Март

Апрель


Количество животных

инъециро-ванных

давших реакцию

инъециро-ванных

давших реакцию

инъециро-ванных

давших реакцию

инъециро-ванных

давших реакцию

5,00

3

3













2,30









3

3





1,84









3

2





1,72













3

3

1,25





2

2









0,92









9

8





0,86













3

3

0,75





3

3









0,62





3

2









0,50

3

3

8

4









0,46









8

4





0,43













3

3

0,30









5

2





0,25

3

3

3

2









0,22













3

2

0.15









3

1





0,13





6

2









0,10

2

0

3

0

3

0

12

6

0,05

3

0

3

0

3

0





0,04













3

0

0,02









3

0

3

0

0,01

3

0









6

0

Впервые реакция спермиации у самцов бесхвостых амфибий под действием гонадотропин-релизинг гормона изучена на квакше (Hyla regilla (Licht, 1974). Было показано, что реакция, являющаяся индикатором резкого освобождения гонадотропина из гипофиза реципиента высокочувствительна, скоротечна и специфична. Полученные нами данные свидетельствуют, что самцы озерной лягушки также являются удобным объектом для испытания активности люлиберина и его аналогов. Эти животные оказались достаточно чувствительными к испытанным препаратам. Сезонная вариабельность в ответе на гормоны относительно невелика, что позволяет использовать лягушек для ориентировочных опытов по крайней мере в течение восьми месяцев в году. Однако более детальное тестирование или сравнение активности различных препаратов целесообразно проводить в один и тот же сезон.



Таблица З

Результаты тестирования а-ЛГРГ-2 на самцах озерной лягушки

Доза препарата, мкг на животное




Ноябрь

Май

Количество животных

инъециро-ванных

давших реакцию

инъециро-ванных

давших реакцию

1,00

3

3





0,20

3

3





0,14





3

3

0,12





3

3

0,10

6

1





0,09





3

3

0,05





12

7

0,02





6

0

0,01

6

0

3

0



ЛИТЕРАТУРА
Боев А. А. 1980. Рекомендации по заготовке, резервированию, содержанию тест-объектов, тестированию препарата ацетонированных гипофизов рыб и его хранению. М.

Гербильский Н. Л. 1964. Возможна ли в рыбоводстве замена ацетонированных гипофизов другими препаратами.— Вестн. Ленингр. ун-та, 15, 3.

Гончаров Б. Ф. 1984. Синтетический аналог люлиберина — новый перспективный стимулятор созревания половых продуктов осетровых рыб.— ДАН СССР, 276, 4.

Licht P. 1974. Induction of sperm release in frog by mammalian gonadotropin-releasing hormone. — Gen. and Comp. Endocrinol. 23, 3.
скачать файл



Смотрите также:
Использование самцов озерной лягушки для тестирования синтетических аналогов люлиберина
126.13kb.
Процедура контроля качества ооп и учебного процесса
58.88kb.
Создание бд: аналогов, предприятий-конкурентов, предприятий сбыта; директоров предприятий для реализации инноваций
24.69kb.
+ со для производства синтетических жидких топлив (сжт). в условиях значительно возросшей стоимости нефтепродуктов последних лет реализация таких технологий представляется технически и экономически целесообразной
39.62kb.
Центр тестирования и развития в мгу
51.9kb.
Микроконтроллерная система тестирования сбис озу
111.11kb.
Альтернативная организация системы распределенного тестирования приложений на основе Java 2 Enterprise Edition
22.09kb.
Конкурс по естествознанию «Мир, в котором я живу»
522.4kb.
Ю. А. Охроменко 2014 г. Характеристика на приобретение права на использование программ для ЭВМ
53.52kb.
Характеристика на приобретение права на использование программы для ЭВМ. «Система трехмерного моделирования компас-3d v13»
29.75kb.
«Использование электронных таблиц Excel для иллюстрации процессов движения в механике» Янченко Владимир Владимирович учитель физики и информатики моу сош №4
106.1kb.
Использование интернет-ресурсов в библиотечно-информационном обслуживании в контексте современной картины чтения
74.67kb.